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    有了它,操作白介素elisa試劑盒會更簡單

    發布時間: 2023-01-12  點擊次數: 917次
      白介素elisa試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人白介素水平。用純化的人白介素抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白介素,再與HRP標記的白介素抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過洗滌后加底物TMB顯色。
     
      白介素elisa試劑盒的計算:
      以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標, 在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
      試劑盒性能:
      1、樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990以上。
      2、批內與批見應分別小于9%和11%。
     
      血清elisa試劑盒的操作流程如下:
      1、血清總補體ELISA試劑盒待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
      2、酶標板置4℃,包被過夜。
      3、洗板:吸干孔內反應液,產品僅用于科研用洗滌液過洗一遍,之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
      4、陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
      5、酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
      6、洗板,同(4)。
      7、每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
      8、酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
      9、洗板,同(4)。
      10、每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
      11、每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
      12、分別測450nm吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
      13、數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。




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