分享使用人elisa試劑盒的詳細步驟

發布時間： 2023-04-18　　點擊次數： 1808次

　　ELISA（酶聯免疫吸附實驗）是一種廣泛用于生物醫學研究和臨床診斷的技術。人elisa試劑盒是一套預先包裝好的組件，用于檢測特定蛋白質或其他分子在樣本中的存在量。下面是使用人elisa試劑盒的詳細步驟：

　　步驟1：收集樣本

　　首先需要收集待測試的樣本。這可以是血液、尿液、唾液等生物樣本。將樣本放入試管中，并將其標記以避免與其他樣本混淆。

　　步驟2：稀釋樣本

　　對于某些樣本，如血清和血漿，需要進行稀釋。這是為了確保樣本中含有足夠低的蛋白質濃度，以避免在后續步驟中出現假陽性結果。通常會用緩沖液稀釋樣品，使得樣品能夠被人elisa試劑盒所檢測。

　　步驟3：裝載試板

　　將96孔板插入孔板支架中，并將每個孔加入要測試的樣本或標準品。每個孔位都需要添加適量的綁定抗體，并進行孵育反應。

　　步驟4：孵育

　　將孔板放入溫度控制器中，一般會將其孵育30-60分鐘，以便樣本中的蛋白質與綁定抗體結合。在此過程中，可以通過輕輕震動微板使物質更充分地混合。

　　步驟5：洗滌

　　使用緩沖液或PBS洗滌孔板，去除不結合的物質。通常需要洗滌2-5次，以確保所有不結合的物質都已被清除。

　　步驟6：加入檢測抗體

　　將檢測抗體添加到每個孔位中，并進行孵育反應。此抗體將與之前的綁定抗體結合，并形成一個復合物。這個復合物是將要檢測的蛋白質、抗原或其他生物分子的檢測目標。

　　步驟7：再次洗滌

　　使用緩沖液或PBS洗滌孔板，去除不結合的物質。

　　步驟8：加入底物

　　將底物HRP（過氧化物酶）添加到每個孔位中，并進行孵育反應。復合物將與底物發生反應，產生顏色變化的信號。

　　步驟9：終止反應

　　在可見的顏色出現之前，及時添加停止反應的緩沖液。這會阻止進一步產生顏色，并穩定復合物的信號。

　　步驟10：測量信號

　　使用讀數器或多光譜分析儀測量每個孔位的吸光度。吸光度與蛋白質、抗原或其他生物分子的存在量成正比。根據標準曲線計算樣品中蛋白質的含量。

　　人elisa試劑盒是一種用于檢測特定生物分子的快速、靈敏和可靠的方法。通過遵循以上步驟，可以使用人elisa試劑盒進行高質量的實驗并得到準確的結果。