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| 品牌 | 其他品牌 | 貨號 | BFN6072012687 |
|---|---|---|---|
| 規格 | T25培養瓶x1 1.5ml凍存管x2 | 供貨周期 | 現貨 |
| 主要用途 | 僅供科研 | 應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
細胞名稱 | 人成骨細胞系hFOB1.19 |
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貨物編碼 | BFN6072012687 | ||
產品規格 | T25培養瓶x1 | 1.5ml凍存管x2 | |
細胞數量 | 1x10^6 | 1x10^6 | |
保存溫度 | 27℃ | -198℃ | |
運輸方式 | 常溫保溫運輸 | 干冰運輸 | |
安全等級 | 1 | ||
用途限制 | 僅供科研用途 1類 | ||
培養體系 | DMEM高糖培養基+10%FBS+1%雙抗 | ||
培養溫度 | 37℃ | 二氧化碳濃度 | 5% |
簡介 | 人成骨細胞系hFOB1.19在0.6mg/ml新霉素G418存在下，用溫度敏感的表達載體pUCSVisA58轉染自然流產的胎兒四肢組織，建立了此細胞系。在許可溫度33.5oC下細胞分裂很快，而在限制溫度39.5oC下細胞極少分裂或不分裂。這些細胞具有分化為表達造骨細胞表型的成熟造骨細胞的能力。這些細胞提供了一個同質化的快速增殖模型系統，用于研究正常人造骨細胞的分化，造骨細胞生理和激素，生長因子，和對造骨細胞的功能及分化有影響的細胞因子。該細胞引種自ATCC CRL-11372 | ||
注釋 | Group: Space-flown cell line (cellonaut). Doubling time: 36 hours, at permissive temperature of 33.5 Celsius (ATCC). Transfected with: UniProtKB; P00552; Transposon Tn5 neo. Transformant: NCBI_TaxID; 1891767; Simian virus 40 (SV40) [tsA58]. Anecdotal: Have been flown in space on shuttle flight STS-80 to study growth in microgravity (PubMed=10719274). | ||
STR信息 | Amelogenin X CSF1PO 10,13 D2S1338 23,24 D3S1358 17,18 D5S818 11,12 D6S1043 13,16 D7S820 8,10 D8S1179 10,14 D12S391 20,23 D13S317 11,12 D16S539 9,13 D18S51 10,17 D19S433 13,15 D21S11 29,32.2 FGA 19,22 Penta E 8,11 TH01 7,9.3 TPOX 11 vWA 16,18 | ||
參考文獻 | Patent=US5693511 Harris S.A., Spelsberg T.C. Immortalized human fetal osteoblastic cells. Patent number US5693511, 02-Dec-1997
PubMed=10719274; DOI=10.1016/S8756-3282(00)00234-9 Harris S.A., Zhang M., Kidder L.S., Evans G.L., Spelsberg T.C., Turner R.T. Effects of orbital spaceflight on human osteoblastic cell physiology and gene expression. Bone 26:325-331(2000)
PubMed=12210717; DOI=10.1002/jcb.10259 Subramaniam M., Jalal S.M., Rickard D.J., Harris S.A., Bolander M.E., Spelsberg T.C. Further characterization of human fetal osteoblastic hFOB 1.19 and hFOB/ER alpha cells: bone formation in vivo and karyotype analysis using multicolor fluorescent in situ hybridization. J. Cell. Biochem. 87:9-15(2002) | ||
驗收細胞注意事項
1、收到人成骨細胞系hFOB1.19細胞，請查看瓶子是否有破裂，培養基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快聯系。
2、收到人成骨細胞系hFOB1.19細胞 ，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題，細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況，出現此狀態時，請不要打開細胞培養瓶，應立即將培養瓶置于細胞培養箱里靜止 3-5 小時左右，讓細胞先穩定下，再于顯微鏡下觀察，此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。
3、收到人成骨細胞系hFOB1.19細胞后，請鏡下觀察細胞，用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多，請離心收集細胞，接種到一個新的培養瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養基，使用進口胎牛血清。剛接到細胞，若細胞不多時 血清濃度可以加到 15％去培養。若細胞迏到 80%左右 ，血清濃度還是在 10％。
4、收到人成骨細胞系hFOB1.19細胞時如無異常情況 ，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養瓶中培養基吸出，留下 5-10ML 培養基繼續培養：超過 80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞，吸出培養液，1000 轉/分鐘離心 3 分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
5、將培養瓶置于 37℃培養箱中培養，蓋子微微擰松。吸出的培養基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于 4℃冰箱，以備不時之需。
6、24 小時后，細胞形態已恢復并貼滿瓶壁，即可傳代。（貼壁細胞）將培養瓶里的培養基倒去，加 3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準）PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化，消化時間以具體細胞為準，一般 1-3 分鐘，不超過 5 分鐘。可以放入37℃培養箱消化。輕輕晃動瓶壁，見細胞脫落下來，加入 3-5ml 培養基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內離心，1000rpm/5min。棄上清，視細胞數量決定分瓶數，一般一傳二，如細胞量多可一傳三，有些細胞不易傳得過稀，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶，以具體細胞和經驗為準。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。
7、貼壁細胞 ，懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時，換新的細胞培養瓶和換新鮮的培養液，37℃，5%CO2 培養。
特別提醒： 原瓶中培養基不宜繼續使用，請更換新鮮培養基培養。
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